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抗A1(IgM)

?【预期用途】

抗A1血型试剂检测A1抗原;抗H血型试剂检测H抗原;抗C血型试剂检测C抗原;抗c血型试剂检测c抗原;抗E血型试剂检测E抗原;抗e血型试剂检测e抗原;抗P1血型试剂检测P1抗原;抗K血型试剂检测K抗原;抗S血型试剂检测S抗原;抗s血型试剂检测s抗原;抗Jka血型试剂检测Jka抗原;抗Jkb血型试剂检测Jkb抗原。

【检验原理】

通过试管法或微孔板法使用这种试剂会使红细胞携带的特异性抗原(测试呈阳性)凝集。红细胞不凝集表明缺少特异性抗原(测试呈阴性)。

【主要组成成份】

由单克隆IgM抗体及含有高分子增效剂的缓冲溶液组成的。试剂含有0.1%(w/v)的叠氮钠和牛血清白蛋白。

【储存条件及有效期】

2~8℃避光密封保存,避免高温或反复冻融。有效期自检定合格之日起12个月。

【适用仪器】

血型血清学离心机。

【样本要求】

(1) 不适合严重脂血、溶血的样本。

(2) 自身免疫性溶血性贫血患者必须排除自身凝集后,才能准确定型。

(3) 有纤维蛋白存在的情况下应除去纤维蛋白。

【检验方法】

抗A1、抗H (试管法)

(1) 用生理盐水配制3~5%待测红细胞悬浮液。

(2) 在做好标记的试管中添加50μl(1滴)抗A1或抗H试剂。

(3) 添加50μl(1滴)待测红细胞悬浮液。

(4) 混匀,室温孵育5分钟。

(5) 3000rpm离心20秒。

(6) 轻轻摇动试管使红细胞重悬并肉眼观察凝集结果。

抗C、抗c、抗E、抗e、抗K(试管法)

(1) 用生理盐水配制3~5%待测红细胞悬浮液。

(2) 在做好标记的试管中添加50μl(1滴)抗c或抗C或抗e或抗E或抗K试剂。

(3) 添加50μl(1滴)3~5%待测红细胞悬浮液。

(4) 混合,并在3000rpm离心20秒。

(5) 轻轻摇动试管使红细胞重悬并肉眼观察凝集结果。

(6) 阴性或弱阳性测试应在37℃孵育5分钟后重复步骤4和5后观察结果,以提高红细胞罕有表型的反应强度。

抗P1(试管法)

(1) 用生理盐水配制3~5%待测红细胞悬浮液。

(2) 在做好标记的试管中添加100μl(2滴)待测红细胞悬浮液。

(3) 添加100μl(2滴)抗P1试剂。

(4) 3000rpm离心20秒。

(5) 轻轻摇动试管使红细胞重悬并肉眼观察凝集结果。

抗S(试管法)

(1) 用生理盐水配制3~5%受检红细胞悬浮液。

(2) 在做好标记的试管中添加50μl(1滴)抗S试剂。

(3) 添加50μl(1滴)待测红细胞悬浮液。

(4) 混合,并在3000rpm离心20秒。

(5) 轻轻摇动试管使红细胞重悬并肉眼观察凝集结果。

(6) 所有阴性或弱阳性测试应都在室温下孵育5分钟,重复4和5阶段,以提高红细胞罕有表型的反应强度。

抗s(试管法)

(1) 用生理盐水配制3~5%待测红细胞悬浮液。

(2) 在做好标记的试管中添加2滴测试的悬浮红细胞。

(3) 添加100μl(2滴)抗s试剂。

(4) 3000rpm离心20秒。

(5) 轻轻摇动试管使红细胞重悬并肉眼观察凝集结果。

抗Lea或抗Leb试剂(试管法)

(1) 用生理盐水配制3~5%待测红细胞悬浮液。

(2) 在做好标记的试管中添加100μl(2滴)抗Lea或抗Leb试剂。

(3) 添加50μl(1滴)受检红细胞悬浮液。

(4) 混合,并在室温下孵育15分钟。

(5) 3000rpm离心20秒。

(6) 轻轻摇动试管使红细胞重悬并肉眼观察凝集结果。

抗Jka或抗Jkb试剂(试管法)

(1) 用生理盐水配制3~5%待测红细胞悬浮液。

(2) 在做好标记的试管中添加50μl(1滴)抗Jka或抗Jkb试剂。

(3) 添加50μl(1滴)待测红细胞悬浮液。

(4) 混合,并在37℃下孵育5分钟。

(5) 在3000rpm离心20秒。

(6) 轻轻摇动试管使红细胞重悬并肉眼观察凝集结果。

(7) 所有弱阳性、阴性测试都在37℃下孵育10分钟,重复4和5步骤。这可能会提高红细胞罕有表型的反应强度。

抗C、抗c、抗E、抗e、抗K、抗S(微孔板法)

(1) 用生理盐水配制3~5%待测红细胞悬浮液。

(2) 在一个标准的U型微孔板测试孔中添加50μl(1滴)抗C或抗c或抗E或抗e或抗K或抗S试剂。

(3) 将50μl(1滴)待测红细胞悬浮液添加到相应的测试孔中。

(4) 手动或摇床混合孔中内容物。

(5) 在室温下孵育15~20分钟。

(6) 微孔板在3000rpm离心40秒。

(7) 悬浮红细胞使用微孔板摇床(如步骤4)。

(8) 观察测试结果并记录。

【检验结果的解释】

1. 阳性结果:红细胞凝集,为阳性结果。

2. 阴性结果:红细胞不凝集,为阴性结果。


【检验方法的局限性】

1. 直接抗球蛋白试验(DAT)阳性的红细胞,可能会产生假阳性结果。

2. 酶处理的红细胞可能会与抗体试剂发生假阳性反应。不新鲜的血液样本测试时可能获得较弱的反应。

3. 试品污染或任何技术偏差,可能会出现假阳性或假阴性结果。

【注意事项】

1. 所有血液产品应被视为具有潜在传染性。用于生产这种试剂的人类捐助或细胞株已经过测试,并发现对抗HIV,抗HCV,乙肝表面抗原,EB病毒和鼠抗体(MAP)阴性反应。没有已知的测试可以保证产品从人体血液中产生不携带任何传染性病原体。在使用该产品时注意防护。

2. 试剂含有0.1%(w/v)的叠氮钠。叠氮钠吸入体内有毒,切勿摄入。叠氮钠能与含铅或铜的管道发生反应而生成易爆的金属叠氮化物,处理时用大量清水冲洗。

3. 该试剂为澄清液体,浑浊可能表明细菌污染。该试剂如果有沉淀物,纤维蛋白胶或颗粒存在不得使用。

4. 该试剂仅供科研使用,不用于体外诊断。

5. 该试剂所用的牛血清白蛋白没有传播性海绵状脑病(TSEs)。

6. 废弃物可使用适当浓度的消毒剂浸泡过夜或高压灭菌处理。


 
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